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PCDH1原鈣黏素1ELISA試劑盒

產品簡介

PCDH1原鈣黏素1ELISA試劑盒公司正在銷售的產品:NFKB p52/NF-κB2 p0/FITC 熒光標記核因子/k因結合核因子 p52/p0抗體IgG阿魏 99%
Phospho-NF-κB2 p0 (Ser866/870)/FITC 熒光標記核因子/k因結合核因子p0抗體IgG阿魏 ,≥99.5%(HPLC)
p-NFKBp65(Ser536)/FITC 熒光標記化核因子/化k因結

更新時間:2022-05-26
訪問次數:690
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樣本實驗前準備:

ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。

1)血清

室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

2)血漿:

應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

3)尿液:

用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。

4)細胞培養上清:

檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。

5)培養細胞

檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

6)組織標本

切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

產品屬性:

產品名稱

PCDH1原鈣黏素1ELISA試劑盒

英文名稱

PCDH1 ELISA Kit

產品規格

48T/96T

產品貨號

LZ-E028655


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檢測程序:

1.  加樣:每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ,將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。

2.  洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。

3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。

4.  洗板:同前。

5.  每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。

操作步驟:

1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。

5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。

7.溫育:操作同3。

8.洗滌:操作同5。

9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘。

10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

標本要求:

1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。

2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

需要而未提供的試劑和器材:

1. 產品僅用于科研標準規格酶標儀

2. 高速離心機

3. 電熱恒溫培養箱

4. 干凈的試管和Eppendof管

5. 系列可調節移液器及吸頭,一次檢測樣品較多時,用多通道移液器

6. 蒸餾水,容量瓶等。

備試劑與收集血樣:

1.  收集標本:血清、血漿(EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養上清液、組織勻漿等盡早檢測, 2-8 ℃ 保存48 小時;更長時間須冷凍( -20   ℃或 -70   ℃ )保存,避免反復凍融。

2.  標準品液配制:使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設標準 管 8 管,管加標本稀釋液 900ul ,第二至第八管加入標本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標準品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反復作對倍稀釋,從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。

3.  10× 標本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋( 示例: 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水)。

4.  洗滌液:用重蒸水 1:20 稀釋(示例:1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水)

心肌特異性肌鈣蛋白T(c)試劑盒 巴美靈二乙二丁醋酯 98%燒石棉 CP,20-30目

心肌特異性肌鈣蛋白T(c)試劑盒 白曼陀羅素N,N-二乙酰 P,98.0% 氫鈉 AR(劇品)

肌球蛋白重鏈(MHC)試劑盒 白桑八N,N-二乙 99.0%亞硝鈷鈉 99.995% metals basis

肌球蛋白重鏈(MHC)試劑盒 半齒澤蘭素色烯N,N-二乙 CP,98.0%  燒石棉 CP, 10-20目

熱休克蛋白27(HSP-27)試劑盒半翅鹽膚木內酯N,N-二乙 重蒸餾, ≥99.5%鄰聯苯 AR,98%

熱休克蛋白27(HSP-27)試劑盒北升麻寧雙烯酰 99%鄰聯苯 CP,97%

血管抑素/血管穩定蛋白(ANG)試劑盒 苯酰硫二乙酯 CP鄰聯苯 分析標準品,用于環境分析,≥99%(GC)

血管抑素/血管穩定蛋白(ANG)試劑盒 吡喃葡糖硫二乙酯 GR鹽鄰聯苯 AR

心型脂肪結合蛋白(h-FABP)試劑盒 鞭打繡球甙 A3-二 99%式碳鋅 AR,57.5%

心型脂肪結合蛋白(h-FABP)試劑盒 鞭打繡球 B二異丁 異構體混合物,97%甘氨 AR,99.5-100.5%

血管舒緩激肽(BK)試劑盒 表斷馬錢子甙半縮內酯二異丁 99%甘氨鈉 98%

血管舒緩激肽(BK)試劑盒 表千金藤默星異辛 AR甘氨酯鹽鹽 99%

肌球蛋白輕鏈(MLC)試劑盒波爾定異辛 CP,98.0%甘氨乙酯鹽鹽 99%

肌球蛋白輕鏈(MLC)試劑盒補骨脂A乙酰乙乙酯 AR,98%氟鋁 98.5%

α-輔肌動蛋白3(ACTN-3)試劑盒布拉易林乙酰乙乙酯 CP,97%氟硅 AR,99.0%

α-輔肌動蛋白3(ACTN-3)試劑盒布盧門 B乙酰乙乙酯  >99.0%(GC)氟硅 99.999% metals basis
PCDH1原鈣黏素1ELISA試劑盒溴化乙啶(Ethidium Bromide EB)是一種DNA 結合性熒光色素,其激發波長510nm。發射波長595nm。產生桔紅色熒光。

EB 不具有膜通透性,不能透過活細胞膜,只能染死細胞,因此用EB 單染時,正常細胞不著色,早期凋亡細胞呈微弱桔紅光,晚期凋亡細胞桔紅色熒光增強。死細胞呈強桔紅光。EB 常與橙合用雙染進行凋亡檢測,與橙雙染時,正常細胞中EB 不能透膜著色,而橙可透過細胞膜,使細胞呈綠色均勻熒光,細胞圓形均勻;而在凋亡細胞中,細胞皺縮、染色質凝聚、固縮或斷裂,出芽,凋亡小體形成。染上致密濃染的黃綠色熒光,或黃綠色顆粒;而壞死細胞被EB 染成桔紅色,由此熒光顏色和細胞形態可區分出正常細胞、凋亡細胞及壞死細胞。

儲存:2-8℃,避光,有效期12個月。



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